滨松中国成像大赛

往届作品展示

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Scat-3细胞系FRET光谱成像

参赛者信息:张莉丽

作者单位:华南师范大学

所用相机:Flash 4.0(C11440-22CU)

成像方法:FRET,宽场荧光成像

显微镜物镜:EC Plan-NeoFluar 40x 1.3 Oil

拍摄条件:250ms曝光时间

详细描述

      我们的体系中有一个电压控制的光谱分光滤光片,可以控制通过的荧光信号波长,其波长分辨率为10nm。采用这套系统,我们就可以将荧光信号没10nm取一个荧光强度数值,进行校正后即可得到样品荧光的光谱数据。
        图中的样品为Scat-3细胞系,其中转了CFP-Venus FRET 系统
,将CFPVenus两个荧光蛋白通过一段很短的序列连在了一起,这个序列为Caspase-3的酶切位点,而Caspase-3是细胞凋亡过程中会大量表达的一个蛋白。所以在细胞没有凋亡的时候,CFPVenus是在一起的,会有FRET信号;而当细胞进入凋亡流程,大量表达的Caspase-3会剪切其酶切位点,使得CFPVenus分开,FRET信号减弱。